高效液相色譜儀是實(shí)驗(yàn)室的“寶貴資產(chǎn)”，價(jià)格昂貴，作用關(guān)鍵。一套維護(hù)得當(dāng)?shù)腍PLC系統(tǒng)，不僅能保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確可靠，還能大幅延長(zhǎng)使用壽命，為您省下可觀的維修和耗材費(fèi)用。今天，我們就來(lái)詳細(xì)拆解一下HPLC的日常維護(hù)內(nèi)容和必須牢記的注意事項(xiàng)。

相關(guān)產(chǎn)品推薦：1、高效液相色譜儀  2、超高效液相色譜儀  3、制備液相色譜儀  4、專(zhuān)用液相色譜儀

一、 每日必做的維護(hù)功課（良好習(xí)慣是基礎(chǔ)）

每天花十幾分鐘做好這些事，能避免大部分突發(fā)故障。

流動(dòng)相：源頭決定成敗

水質(zhì)要純：堅(jiān)決使用HPLC級(jí)或超純水，普通去離子水是萬(wàn)不可取的。

過(guò)濾要嚴(yán)：所有流動(dòng)相，包括水相和有機(jī)相，使用前必須經(jīng)過(guò)0.45μm或更精細(xì)的0.22μm濾膜進(jìn)行抽濾。這一步是防止系統(tǒng)堵塞的頭道防線(xiàn)。

脫氣要凈：流動(dòng)相使用前必須脫氣，消除溶解的氣體，防止在泵和檢測(cè)器中產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致壓力不穩(wěn)和基線(xiàn)“跳舞”。超聲脫氣簡(jiǎn)單常用，但配有在線(xiàn)脫氣機(jī)的效果更佳。

泵系統(tǒng)：心臟的養(yǎng)護(hù)

結(jié)束沖洗是關(guān)鍵：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，如果使用了緩沖鹽或者含鹽的流動(dòng)相后，先拿10%甲醇水溶液沖洗柱子30分鐘，確保離子殘留被充分清除，之后再換用高比例有機(jī)相（如90%甲醇或乙腈）沖洗30分鐘。這里要注意，別用純水直接沖，容易引起填料塌陷，反而損壞柱子。次日使用前需用相同比例水-甲醇過(guò)渡20分鐘。這個(gè)步驟能有效防止鹽結(jié)晶和微生物滋生，是泵和色譜柱的長(zhǎng)壽秘訣。

開(kāi)始要平衡：開(kāi)機(jī)后，先用中等流速的起始流動(dòng)相平衡系統(tǒng)10-15分鐘，讓壓力和基線(xiàn)穩(wěn)定下來(lái)，再開(kāi)始正式實(shí)驗(yàn)。

自動(dòng)進(jìn)樣器：細(xì)節(jié)定乾坤

針頭要干凈：每次做完實(shí)驗(yàn)，用純甲醇或乙腈多次沖洗進(jìn)樣針和外壁，防止樣品交叉污染或結(jié)晶堵塞針頭。

墊片及時(shí)換：進(jìn)樣口的隔墊是易耗品，當(dāng)進(jìn)樣次數(shù)達(dá)到一定數(shù)量或發(fā)現(xiàn)針口有刺穿毛邊時(shí)，應(yīng)及時(shí)更換，避免漏液。

色譜柱：核心的守護(hù)

加裝保護(hù)柱：在分析柱前加裝一根小小的保護(hù)柱，成本不高，但能像“衛(wèi)士”一樣攔截強(qiáng)保留雜質(zhì)和顆粒物，極大延長(zhǎng)昂貴分析柱的壽命。

妥善保存：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，按流程沖洗干凈色譜柱后，務(wù)必用兩端的堵頭緊緊擰好，防止柱床干涸。如果長(zhǎng)期不用，應(yīng)保存在純有機(jī)相（如甲醇）中。

表1.HPLC 日常維護(hù)核心內(nèi)容分類(lèi)表

二、 定期執(zhí)行的深度保養(yǎng)（防患于未然）

除了日常功課，定期的深度保養(yǎng)同樣。

每周檢查：檢查泵頭是否有漏液跡象，查看在線(xiàn)過(guò)濾器的顏色變化，若已變深，應(yīng)取出清洗或更換篩板。

每月維護(hù)：根據(jù)使用頻率和緩沖鹽的強(qiáng)度，定期（如每3-6個(gè)月）計(jì)劃更換泵密封墊。記錄氘燈的使用時(shí)間，接近額定壽命時(shí)（通常1000-2000小時(shí)）留意基線(xiàn)變化，提前準(zhǔn)備備件。

按需保養(yǎng)：當(dāng)發(fā)現(xiàn)檢測(cè)器基線(xiàn)噪音明顯增大時(shí)，可能是流通池臟了或有氣泡，需要參照儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行流通池的清洗和Purge操作。

三、 必須牢記的注意事項(xiàng)（避開(kāi)這些坑）

緩沖鹽是“重點(diǎn)關(guān)照對(duì)象”

忌諱一點(diǎn)：絕對(duì)禁止將含緩沖鹽的流動(dòng)相留在儀器內(nèi)過(guò)夜，尤其是周末。鹽析結(jié)晶會(huì)嚴(yán)重磨損活塞桿和密封墊，造成永久性損傷。

防止沉淀：緩沖鹽溶液與高比例有機(jī)相混合時(shí)容易產(chǎn)生沉淀，因此在切換流動(dòng)相比例時(shí)要平穩(wěn)過(guò)渡，避免劇烈變化。

表2.緩沖鹽使用關(guān)鍵注意事項(xiàng)表

操作順序要規(guī)范

開(kāi)機(jī)順序：先打開(kāi)在線(xiàn)脫氣機(jī)、檢測(cè)器，再啟動(dòng)泵，后打開(kāi)工作站軟件，讓系統(tǒng)壓力平穩(wěn)上升。

關(guān)機(jī)順序：先停止采集數(shù)據(jù)，然后按上述“結(jié)束沖洗”流程徹底沖洗系統(tǒng)，再關(guān)泵、關(guān)檢測(cè)器，后關(guān)閉軟件和電源。

表3.HPLC 標(biāo)準(zhǔn)操作流程表

安全與環(huán)保不容忽視

處理有毒溶劑時(shí)，務(wù)必在通風(fēng)櫥內(nèi)操作，并佩戴好手套和護(hù)目鏡。

實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢液應(yīng)分類(lèi)收集，交由有資質(zhì)的機(jī)構(gòu)處理，保護(hù)環(huán)境也是保護(hù)我們自己。

好記性不如爛筆頭

準(zhǔn)備一本儀器使用維護(hù)記錄本，詳細(xì)記錄每次的開(kāi)機(jī)狀態(tài)、使用樣品、出現(xiàn)的異常、更換的備件（如氘燈、密封墊）等。這本日志在日后排查故障時(shí)，會(huì)成為你得力的助手。

總結(jié)一下：高效液相色譜儀的維護(hù)并不復(fù)雜，關(guān)鍵在于堅(jiān)持良好的日常習(xí)慣和對(duì)緩沖鹽的高度警惕。把它當(dāng)成您的伙伴，用心呵護(hù)，它必將用穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù)回報(bào)您的工作。

表4.維護(hù)記錄核心要素表

HPLC維護(hù)日志表

HPLC維護(hù)常見(jiàn)問(wèn)題

Q1：開(kāi)機(jī)后泵壓力突然過(guò)高，可能原因是什么？如何處理？

A：主要原因包括流動(dòng)相未充分過(guò)濾導(dǎo)致管路堵塞、色譜柱污染或保護(hù)柱堵塞、單向閥故障。處理方法：先檢查在線(xiàn)過(guò)濾器，若變臟則清洗或更換篩板；若過(guò)濾器正常，斷開(kāi)色譜柱，用二通管連接，若壓力恢復(fù)正常則需沖洗或更換色譜柱/保護(hù)柱；仍異常則拆解清洗單向閥。

Q2：基線(xiàn)持續(xù)“跳舞”（波動(dòng)大），排除氣泡問(wèn)題后還有哪些解決辦法？

A：可能是氘燈老化（查看使用時(shí)長(zhǎng)）、流通池污染或檢測(cè)器電路故障。解決步驟：先更換新氘燈測(cè)試；若無(wú)效，用甲醇-水（1:1）混合液沖洗流通池；仍異常則聯(lián)系工程師檢查檢測(cè)器電路。

Q3：進(jìn)樣后無(wú)色譜峰出現(xiàn)，該從哪些方面排查？

A：分三步排查：1. 進(jìn)樣系統(tǒng)：檢查進(jìn)樣針是否堵塞、進(jìn)樣口隔墊是否漏液，確保樣品正常進(jìn)入系統(tǒng)；2. 色譜柱：確認(rèn)色譜柱與流動(dòng)相匹配，若柱效過(guò)低需更換；3. 檢測(cè)器：檢查檢測(cè)器是否開(kāi)啟、信號(hào)是否正常傳輸，重啟檢測(cè)器及工作站嘗試恢復(fù)。

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